多聚甲醛 批發零售

多聚甲醛固定，確實是老生長談，很多研討生在做實驗時，可能很多師兄師姐都讓他們用多聚甲醛固定，有些可能是為了長時間保管樣本，希望集中起來染色，有些可能是染色后排不上隊，想堅持長時間質量穩定。于是就這么口口相傳下來了。

預固定問題

做科研或臨床時，可能很多FLOWER習氣性都會用4％多聚甲醛預先固定標本，可能出于三個目的： （1）為了滅活標本里面可能存在的微生物（細菌、病毒等），起到安全保證作用。 （2）希望標本能夠較長時間存放 （3）做胞內染色前的準備。 但是，可能很多人忽視了一點，就是假設在染色之前用多聚甲醛固定標本，細胞表面有些位點在固定后構象發作改動，使得抗體無法別離產生假陰性，也可能由于固定作用，招致其它位點產生非特異性別離（假陽性）。

因此，知道哪些抗體染色前不能預固定貼心的技術人員曾經幫我們做了一系列測試，下面兩張表，一張是人類抗原，一張是小鼠抗原，可以看的出來，大多數不能做預固定的抗體都是趨化因子受體，所以，大家在實驗中千萬要留意不要先固定后染色。

表1、4％多聚甲醛預固定對各種抗體表面染色的影響（人類），打勾的為允許預固定，打叉的表示預固定影響很大

表2、4％多聚甲醛預固定對各種抗體表面染色的影響（小鼠），打勾的為允許預固定，打叉的表示預固定影響很大

染色后固定問題

染色后的固定，就與抗原構象關系不大了，更多的是熒光素。以前4色以內的時分，用的熒光素都是非串聯的，因此大多數影響不大，但隨著各種新型串聯染料的呈現，多聚甲醛固定就成了問題了。

事實上，當你去搜索串聯染色標志（如PE-cy7、APC-cy7等）的抗體時，會發現一些比較細致的描畫里面會注明（以BD網站搜索APC-cy7各類抗體為例）：

Fixed cells should be analyzed within 4 hours of fixation in paraformaldehyde or transferred to a paraformaldehyde-free buffer for overnight storage.

意義就是用多聚甲醛固定過的樣本，必需在4小時內檢測，否則容易招致串聯染料降解，若要長時間保管，還是需求洗濯后，轉移到不含多聚甲醛的緩沖液中。

需求留意的是，做GFP熒光檢測的同窗，也需求留意一下，多聚甲醛固定也會影響GFP，New York Medical College的Paul A Lucas以為是由于多聚甲醛固定后，并非使GFP熒光淬滅，而是使GFP蛋白構象發作改動，無法產生熒光。有時分你固定后檢測到的熒光可能是自發熒光，或剩余的未被改動構象的GFP發出的。

處方案

1、假設檢測的是前述表格中容易被多聚甲醛影響的分子，請盡量不要預固定，如需長期保管樣本，可以思索凍存單個核細胞。

2、假設檢測的是前述表格中不會受多聚甲醛影響的分子，可用1％多聚甲醛預固定保管，但FSC、SSC和熒光強度影響較大，如需避免此類缺陷，可思索流式中文網研發的細胞保管液。流式中文網的細胞保管液不含多聚甲醛，具有緩釋輕柔的固定作用，故保管更耐久，效果更佳，樣本：保管液＝6：1～10：1，21～28天內檢測均可獲得良好的檢測結果。

3、假設希望在染色后堅持較長時間熒光穩定，仍首選建議：避光、4度，在我們非正式的10色（BV405、KO、FITC、PE、ECD、PE-cy5.5、PE-cy7、APC、APC-A700、APC-cy7）流式檢測時，曾經測過數例，在避光、4度保管24小時后，熒光強度幾乎無變化，細胞分群良好。  假設仍不放心，可思索置辦商品化的適用于串聯染料的專用固定劑。

 

咨詢熱線：17320188259